Достоверность пцр на вич, особенности проведения пцр анализа, другие методы диагностики вич в организме

ПЦР — это один из основных методов диагностики инфекционных заболеваний. Применяется он и при определении ВИЧ инфекции.

Используется ПЦР для различных целей.

Это может быть:

• первичная диагностика инфекционного заболевания;
• оценка прогноза;
• определение вирусной нагрузки;
• подбор лечения;
• определение резистентности к антиретровирусным препаратам.

В ходе реакции ПЦР выявляют РНК вируса или ДНК провируса из клеток крови. Точность исследования достаточно высокая.

Наибольшая точность у метода, предполагающего обнаружение ДНК. Он позволяет выявить провирус при его концентрации от 1 до 5 копий ДНК на 1 миллион клеток. Исследование обладает высокой специфичностью. Она достигает 97%. Причем, если обнаруживается высокая вирусная нагрузка, то специфичность теста достигает 100%.

Ложноположительные результаты всегда дают низкий уровень вирусной нагрузки. Поэтому при обнаружении такого результата может потребоваться повторное определение ДНК провируса.

ПЦР имеет ограниченное применение. Этот анализ используется чаще всего не для первичной диагностики инфекции, а уже в процессе лечения. Тогда как первичная диагностика проводится с помощью серологических исследований. Это анализы, при которых в крови определяется уровень антител к ВИЧ. Они стоят гораздо дешевле.

ПЦР обходится пациенту в частных лабораториях в сумму 150-200 долларов США. Тем не менее, иногда этот способ бывает необходимым и при первичной диагностике инфекции. Он раньше всего становится информативным.

С помощью анализа можно диагностировать ВИЧ уже в острый период. В это время человек страдает от повышенной температуры тела, боли в мышцах и суставах, тошноты высыпаний на коже и других симптомов.

Хотя иногда они отсутствуют.

Острый период наступает сразу после инфекционного. В это время антитела методом ИФА еще могут не определяться. А ПЦР уже становится положительной. Однако оснований для назначения данного исследования при возникновении у больного ранних симптомов ВИЧ обычно не возникает. Потому что эти симптомы неспецифичны.

Человек просто идет к терапевту и лечится от острой респираторной вирусной инфекции.

Только если у него есть основания считать, что он заражен ВИЧ-инфекцией, может проводиться первичная диагностика методом ПЦР. Например, если человек имел половые контакты с ВИЧ-положительным партнером.

А впоследствии у него проявились симптомы, вызывающие подозрение на инфицирование. Тогда ПЦР даст возможность раньше выявить заболевание и получить своевременную терапию.

Ему будут назначены антиретровирусные препараты, которые блокируют размножение вируса и предотвращают нарушения иммунитета.

Антитела становятся положительными только в латентный период. Определение ДНК провируса может быть качественным или количественным. Качественный анализ означает, что результат выдается положительный или отрицательный. Вирусная нагрузка не определяется.

В диагностике ВИЧ вирусная нагрузка имеет большое прогностическое значение. Поэтому чаще используется количественный тест. ПЦР таким образом помогает выяснить, насколько много вирусов содержится в крови пациента. Исходя из этого, планируется необходимый объем терапевтических мероприятий.

Тест ПЦР ультрачувствительный. Он почти не дает ложноотрицательных анализов. Потому что благодаря ПЦР можно выявлять даже минимальные концентрации вируса в организме.

Этот метод часто используется для первичной диагностики ВИЧ инфекции у детей, которые рождены от больных матерей.

Анализ на антитела в детском возрасте не информативен. Потому что в их крови могут циркулировать антитела матери. Их наличие не говорит о том, что ребенок болен.

Поэтому в первые 2 месяца жизни малыш должен сдать анализ на ВИЧ методом ПЦР. Через несколько месяцев его проводят повторно. Если оба анализа отрицательные, нет оснований полагать, что у ребенка инфекция. Скорее всего, он здоров.

Но кормить грудью его нельзя. Потому что вирус передается через грудное молоко.

В возрасте 1 год при отрицательных результатах анализов ребенка снимают с учета. Показанием для обследования детей может быть только их рождение от ВИЧ-позитивных матерей. Потому что симптомов инфекции у них нет до возраста 5 лет и более. Очень редко клинические признаки появляются раньше.

В среднем риск передачи ВИЧ от матери к ребенку, если она больна, составляет 30%. Антитела в детском организме к этому возбудителю могут обнаруживаться в течение первых полутора лет жизни. К этому времени ребенок серопозитивный всегда, независимо от наличия у него заболевания. После 2 лет жизни диагностика может проводиться с помощью анализа крови на антитела.

Анализ нет смысла сдавать в первые дни жизни ребенка. Потому что в это время возможны ложноотрицательные результаты. Только у одного ребенка из трех в этот период может быть выявлено ДНК провируса в случае, если малыш инфицирован. А вот спустя месяц чувствительность теста достигает 93%.

Это меньше, чем у взрослых. Именно по этой причине требуется двукратное проведение теста с разрывом в 1-2 месяца. Проведение химиопрофилактики ВИЧ не снижает диагностической ценности исследования, что является одним из его преимуществ.

Помимо ДНК провируса, определяется также РНК вируса иммунодефицита человека. Это исследование проводится в основном не для первичной диагностики. Оно назначается пациентам с уже диагностированным заболеванием. Основная цель — это мониторинг эффективности терапии и прогноз патологии. Для определения РНК — это ранний маркер результативности лечения.

С помощью этого метода:

• решается вопрос о назначении антиретровирусной терапии;
• оценивается, насколько эффективным является проводимое лечение;
• проводится мониторинг клинического течения инфекции;
• у беременных с помощью данного теста на месяц до родов определяется риск передачи ВИЧ ребенку, соответственно, оценивается целесообразность кесарева сечения.

Кроме того, с помощью ПЦР тестируют донорскую кровь. Данный метод диагностики указан в соответствующем приказе РФ от 2008 года.

Разные тест-системы выявляют вирус в разных концентрациях. Минимальный порог отличается. Он может быть от 20 копий в мл, тогда как другие системы определяют только от 150 копий в мл.

Вместе с исследованием на РНК вируса иммунодефицита может быть проведена оценка чувствительности к антиретровирусным препаратам. Это возможно только в случае, если вирус определяется в количестве более 1 тысячи копий в мл.

Оценивается чувствительность к таким препаратам:

• ингибиторам протеазы;
• ненуклеозидным или нуклеозидным ингибиторам обратной транскриптазы.

Показания к исследованию:

• снижение эффективности проводимой терапии, если нет других видимых причин уменьшения эффекта от препаратов;
• острый период инфекции, до начала антиретровирусной терапии, если точно известно, что человек инфицирован от партнера, у которого лечение стало неэффективным (имеет место резистентность к препаратам).

Резистентность к антиретровирусной терапии может быть первичной или вторичной.

• Первичная — это когда человек изначально заражен устойчивым вирусом.
• Вторичная развивается в случае, когда человек неправильно лечился.

Например, не вовремя получал препараты, делал перерывы в лечении, получал неадекватные дозы и т.д.

Признаки резистентности:

• РНК вируса иммунодефицита не снижается в течение 6 недель лечения;
• рецидив заболевания (обнаружение высокой концентрации РНК на фоне непрекращающейся терапии, если ранее была достигнута супрессия).

При этом важно исключить другие возможные причины прогрессирования болезни, за исключением резистентности. Нужно убедиться, что лечение действительно было непрерывным. То есть, что больной не игнорировал рекомендации врача и не прекращал лечение. А также что он не имеет заболеваний, при которых может нарушиться усвоение лекарственного препарата в желудочно-кишечном тракте.

Определение резистентности к антиретровирусным лекарствам дает возможность пересмотреть схему терапии. В неё включают те препараты, к которым вирус чувствительный.

Такое лечение не приводит к полному излечению ВИЧ, но:

• продлевает жизнь;
• сохраняет трудоспособность пациента;
• уменьшает риск передачи инфекции;
• нормализует состояние иммунитета.  

Через сколько можно

Часто пациенты спрашивают, через сколько времени можно делать анализ методом ПЦР на ВИЧ. Это исследование проводится гораздо раньше, чем ИФА. Патологию можно выявить в остром периоде, а иногда и в инкубационном периоде. Сдавать анализ можно через 2-4 недели. В то время как кровь на антитела сдают не раньше, чем через 6 недель.

ПЦР на ВИЧ может быть положительным уже спустя 14-21 день после возможного инфицирования.

Но если анализ отрицательный, это не гарантирует отсутствие инфекции.

Лучше провести подтверждающий тест медом ИФА через несколько недель. А вот если ПЦР положительный, то очень мало шансов, что результаты анализа неправильные. Сдать анализ на ВИЧ методом ПЦР можно в нашей клинике.

Наши преимущества:

• нет очередей — сдача анализов по записи на определенное время;
• быстрые сроки выполнения анализов;
• возможность анонимного исследования;
• никому кроме вас мы не сообщим результаты анализов.

У нас используются самые современные методы диагностики, включая определение РНК вируса или ДНК провируса. При необходимости можно оценить результаты терапии и провести оценку резистентности ВИЧ к лечению антиретровирусными препаратами. Результаты вы получите через несколько дней.

Источник: http://www.venerologia.ru/venerologia/pcr-na-vich

Пцр на вич: суть метода, его достоверность и точность

Забор биологического материала для проведения диагностики ВИЧ с помощью ПЦР проводится согласно определенным стандартам. Манипуляция проводится в процедурном кабинете. Используются одноразовые стерильные инструменты. Вскрытие пакета с инструментами проводится непосредственно возле пациента.

Собранный материал помещается в стерильные пробирки, предварительно обработанные CrO3 (хромовая смесь).   В качестве биологического материала выступает венозная кровь, которая сдается в утреннее время и на голодный желудок.

За несколько дней до сдачи анализа следует исключить употребление алкоголя, жирной и острой пищи, прекратить прием медикаментозных препаратов.

Если отменить лекарственные средства невозможно, об этом следует сообщить до проведения анализа. 

Дополнительно может быть взят мазок из уретры и влагалища, для выявления сопутствующих заболеваний, передающихся половым путем.  Исследование проводится анонимно, результаты пациент получает лично в руки. При себе рекомендуется иметь удостоверение личности.

Через сколько времени можно сдавать ПЦР на ВИЧ

Выявить наличие ВИЧ-вируса возможно спустя 4-6 дней после инфицирования. В данном случае информативность анализа будет достигать 85%. Спустя 10-13 дней анализ может определить заболевание с точностью до 98%. Отрицательный результат будет верен только при условии его сдачи не ранее, чем спустя 2 недели после предполагаемого заражения.

Причины ложноположительного результата 

Получить ложноположительный результат достаточно сложно.

Такое возможно при несоблюдении правил забора биологического материала, неправильной маркировки пробирки, использования некачественной тест-системы и других подобных факторов. В остальных случаях шанс получения подобного результата составляет не более 2%.

Через сколько времени можно получить результаты анализа? 

Если смотреть с технической стороны, результаты ПЦР можно получить в течение 4 часов. Однако на практике пациент лабораторное заключение получает от одного до нескольких дней. В целом, сроки проведения зависят от загруженности лаборатории и от того, насколько организованно построена ее работа. 

Проведение полимеразной реакции у новорожденного 

ПЦР назначается в случае, когда ребенок рожден от ВИЧ-положительной матери. Проведение ИФА в данном случае не информативно.

Поскольку у ребенка примерно до 2 лет сохраняются антитела против ретровируса. По этой причине иммуноферментное исследование не даст точного ответа.

  При проведении ПЦР у ребенка возрастом 4-6 недель и получении положительного результата речь будет идти о заражении.

Если ПЦР, проведенный в возрасте от 8 недель до полугода, показывает отрицательные результаты (при условии, что ребенок не питался грудным молоком матери) инфицирование исключается.

Почему для определения ВИЧ ПЦР лучше ИФА? 

Полимеразная реакция позволяет выявить РНК вируса, его наличие в организме, в том числе количественное. Задача ИФА заключается в определении антител к ВИЧ-инфекции. Иммуноферментный анализ относительно определения возможного инфицирования не уступает ПЦР, его точность достигает 99%. Однако, в отличии от ПЦР — не способен определить заболевание на ранних стадиях его развития.

Преимущества проведения ПЦР на ВИЧ

• Полимеразная реакция непосредственно определяет наличие инфекционного агента. К примеру, ИФА может выявить исключительно антитела и продукты жизнедеятельности микроорганизма.
• Анализ четко идентифицирует конкретный патогенный микроорганизм, даже при условии наличия нескольких перекрестно реагируемых. 
• Методика позволяет исследовать любой вид биологического материала, в том числе засохшие капли крови. 

Из недостатков ПЦР можно выделить повышенную чувствительность анализа. Это иногда становится причиной получения ложноположительного результата.

Такое происходит в случае присутствия в пробирке или на инструментах хотя бы незначительного количества постороннего ДНК.

Диагностика ВИЧ с помощью ПЦР и ИФА: расшифровка, достоверность результатов 

Иммуноферментный анализ, при котором результаты тестирования указывают на отсутствие в организме антител к ВИЧ и антигена р24, является отрицательным. В случае наличия данных молекул — выдается положительное диагностическое заключение.  В ряде случаев пациент может получить ложноположительный или ложноотрицательный результат.

Подобное является следствием раннего срока беременности, наличия герпетической инфекции, некорректно проведенного забора материала, нарушения транспортировки пробирок. Кроме того, подобные результаты встречаются у пациентов с протекающими аутоиммунными заболеваниями и гепатитами различного типа.

Может проводиться Western Blot (иммунный блоттинг), который сочетает в себе ИФА и разделение белков вируса.

Тогда положительный результат будет при наличии гликопротеида вирусной инфекции gp160. Он является предшественником гликопротеинов оболочки ВИЧ gp41 и gp120.

Если данные молекулы отсутствуют, заключение лабораторного исследования считается отрицательным. Проведение Western Blot в сочетании с ИФА позволяет получить результаты, достоверность которых превышает 98%.

В случае, когда ИФА положительный, а Western Blot отрицательный — тестирование считается сомнительным и требует проведения ПЦР.

Источник: https://prosifilis.ru/content/pcr-na-vich-sut-metoda-ego-dostovernost-i-tochnost

Диагностика ВИЧ: методы и исследования

Ранняя диагностика заболеваний – залог успешного лечения. Ставшее крылатым выражение, особенно актуально для ВИЧ-инфекции. Ведь заболевание неизлечимо полностью, и только своевременная диагностика позволяет взять течение болезни под контроль и выбрать тактику лечения, чтобы жить полноценной жизнью.

Ранний срок диагностики ВИЧ – со 2 недели от предположительного заражения.

Важность клинической диагностики ВИЧ

В понимании многих людей ВИЧ-инфицированный человек выглядит болезненно, изнеможенно. Он кашляет, чихает, чешется, стонет, у него все болит… На самом деле это не так! Проблема в том, что после инфицирования ВИЧ и в последующий инкубационный период симптомы полностью отсутствуют.

Затем наступает острая фаза, на протяжении которой присутствуют симптомы, напоминающие ОРВИ или грипп. Но и они вскоре проходят, и наступает, так называемый, латентный период – продолжительный промежуток времени, когда ВИЧ-инфекция себя ничем не выдает.

С момента инфицирования и до стадии пред-СПИДа может пройти порядка 10 лет, в течение которых, ни сам пациент, ни его окружение, даже и не подозревают о болезни. А когда она уже на полную мощность заявляет о себе, контролировать ее очень трудно.

Очень важно понимать, что, хотя и есть группы риска – гомосексуалисты, наркозависимые и девушки легкого поведения – в основной массе, пациенты с ВИЧ-инфекцией – это обычные люди.

Они учатся, ходят на работу, посещают общественные места, знакомятся в интернете – в общем, живут как все. К сожалению, но от ВИЧ никто не застрахован.

Незащищенный половой контакт в порыве страсти, заветное тату без соблюдения стерильности, маникюр за полцены у начинающего мастера, уличная драка – все эти и множество других житейских ситуаций могут обернуться инфицированием ВИЧ.

Не ошибается лишь тот, кто не живет! Мы не можем знать все наперед, не можем исправить уже совершенных ошибок, но мы можем предпринять простые шаги для исправления их последствий – обратиться в ближайший кожно-венерологический диспансер, в местную клинику или специализированный СПИД-центр для сдачи анализов и ранней диагностики ВИЧ.

Благоприятные сроки для диагностики ВИЧ

Факт возможного инфицирования и плохое самочувствие без видимых причин – два веских основания для обращения к специалистам.

Но отрицательный результат тестирования на антитела не всегда означает, что человек не инфицирован, так как существует период “серонегативного окна” (время между заражением и появлением антител), который составляет около трех месяцев. Поэтому лучше повторить их спустя 3 месяца с момента возможного инфицирования.

Что касается плохого самочувствия, то поводом провериться на ВИЧ может быть сочетание следующих симптомов:

• увеличение лимфатических узлов на шее, в паху, в области подмышек;
• лихорадка;
• мышечные или головные боли;
• молочница и грибковые поражения, в том числе кандидоз полости рта;
• воспаление слизистой носа, рта или глотки;
• ночная потливость;
• ломота в суставах;
• длительная диарея;
• тошнота, рвота;
• резкое снижение массы тела;
• высыпания на коже.

Важно понимать, что с момента, когда проявляются первые признаки ВИЧ-инфекции и до момента, когда заболевание переходит в латентную стадию, проходит очень мало времени – около 3-6 недель с факта инфицирования.

Нельзя упускать из вида этот промежуток времени! Поскольку последующие 8-10 лет вы будет жить, нормально себя чувствовать и даже не подозревать о том, что больны ВИЧ-инфекцией. Драгоценное время будет упущено.

Современные методы диагностики ВИЧ

В настоящее время в диагностике ВИЧ используется двухуровневый подход – косвенные и прямые тесты. Косвенные тесты позволяют обнаружить в крови пациента специфические антитела к ВИЧ, а прямые тесты помогают выявить собственно сам ВИЧ и определить степень вирусной нагрузки на организм. В России стандартная диагностика ВИЧ включает следующие методы лабораторных исследований:

• ИФА (иммуноферментный анализ).
• Иммуноблот (иммунный блоттинг).

Также могут быть применены следующие методики:

• Экспресс-тест ИХА (иммунохроматография).
• ПЦР (полимеразная цепная реакция).

Диагностические принципы лабораторных исследований и степень их достоверности приведены в нижеследующей таблице.

Метод исследования Диагностический принцип Достоверность Время после заражения

Экспресс-тест ИХА	Выявление антител к ВИЧ	93-99%	с 3 недели
Скрининговый тест ИФА	Выявление антител к ВИЧ и антигенов вируса
Иммуноблот	Антитела к нескольким белкам ВИЧ	99,9%	с 5 недели
ПЦР	Исследуется генетический материал вируса	80%	с 5 дня
98%	со 2 недели

При проведении исследований важно использовать сверхточное оборудование и верно интерпретировать результаты анализов. В противном случае точность диагностики снижается. При этом специалисты считают, что рациональнее всего проводить исследования в следующей последовательности.

1. Сначала экспресс-диагностика, основанная на методе ИХА.
2. В случае положительного результата – еще один анализ крови по методу ИФА.
3. Положительный второй результат – проводится дообследование методом ИФА или иммуноблоттингом.
4. В исключительных случаях для окончательной постановки диагноза можно применить более сложный и дорогостоящий метод ПЦР.

Экспресс-тесты методом ИХА или скрининг ИФА,  предполагающий серологическое иммуноферментное исследование крови, выполняются в течение 15-30 минут. Высокая скорость диагностики актуальна в неотложных случаях, при планировании срочных операций.

Но для постановки окончательного диагноза необходимо использовать основной метод диагностики – иммунный блоттинг. Если результаты ИФА и иммунного блоттинга противоречат друг другу, то возможно проведение референс диагностики – анализ сразу двумя методами. К проведению ПЦР прибегают в исключительных случаях, т.к.

это наиболее дорогостоящий метод исследования. Далее разберем каждый из методов диагностики более подробно.

Экспресс-тест ИХА

Иммунохроматографические тесты неплохо зарекомендовали себя в экспресс-диагностике ВИЧ. Визуально они выглядят как полоски, на поверхность которых наносят исследуемый биологический материал (кровь, слюна).

Для получения результата потребуется всего 10-15 минут, по истечении которых на тесте проявится, или цветная и контрольная полоска – положительный результат, подтверждающий наличие антител к ВИЧ, или только контрольная полоска – отрицательный результат.

С недавнего времени американская компания OraSure Technologies наладила массовое производство экспресс-тестов для домашнего применения. Они отпускаются без рецепта, и при желании их может использовать каждый желающий. Однако необходимо учесть, что по точности диагностики ИХА уступает методу ИФА, а для постановки окончательного диагноза необходимо проведение иммуноблота.

Скрининговый тест ИФА

Принцип метода основан на способности искусственно созданных белков ВИЧ, улавливать вырабатывающиеся в организме человека специфические антитела. В результате взаимодействия, тест-система ИФА изменяет окрас индикатора. Полученные изменения цвета обрабатываются с помощью аппаратуры, которая выдает результат анализа.

При этом необходимо учесть, что скрининговый тест предназначен для выявления не ВИЧ как такового, а антител к нему. А поскольку для их появления в организме, необходимо время, то целесообразнее всего проводить скрининг спустя 3-6 недель после факта возможного инфицирования. Для этого достаточно всего 5 мл крови из вены пациента, забор которой проводят натощак, т.е.

спустя 7-8 часов после последнего приема пищи.

Помимо положительного или отрицательного результата, тест ИФА может дать ложноположительный или ложноотрицательный результат.

• Ложноположительный – речь может идти об сходных по своей структуре антителах, которые вырабатываются в организме при аутоиммунных заболеваниях, множественных миеломах, алкогольном гепатите и других патологиях.
• Ложноотрицательный – скорее всего, тестирование было проведено преждевременно или иммунная система слишком слаба и не вырабатывает антитела к ВИЧ.

При сомнительном результате тест проводится повторно.

Иммунный блоттинг

Иммуноблот – это основной метод диагностики ВИЧ, сочетающий иммуноферментный анализ (ИФА) с предварительным электрофоретическим переносом на нитроцеллюлозную полоску антигенов вируса. Для их выявления анализ проводят в три этапа:

• подготовка нитроцеллюлозной полоски;
• исследование пробы биологического материала пациента;
• трактовка результата.

Таким образом, в ходе проводимого исследования, основные белки ВИЧ распределяются по поверхности в виде отдельных полос, которые проявляются при проведении иммуноферментной реакции и подтверждают наличие или отсутствие антител к антигенам ВИЧ. Полученные в ходе исследования иммунным блоттингом результаты считаются окончательными.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Главное отличие ПЦР от других методов диагностики – тест-система определяет ДНК вируса. С ее помощью можно выявить даже единичные вирусные частицы. Применение метода возможно уже на 5ый день после факта возможного инфицирования с точностью до 80%, что позволяет провести раннюю диагностику ВИЧ. Однако ПРЦ проводят только в исключительных случаях.

• для постановки диагноза новорожденным, появившимся на свет от ВИЧ-инфицированных матерей;
• при сомнительных результатах иммуноблота;
• для оперативного исследования донорской крови;
• для оценки уровня ВИЧ в крови инфицированного пациента.

Несмотря на высокую чувствительность метода ПЦР, он обладает меньшей диагностической чувствительностью к ВИЧ, что объясняется вариабельностью генома вируса. Поэтому для постановки окончательного диагноза данный метод не используется.

Новые и альтернативные методы диагностики ВИЧ

Недавно, сотрудниками Питтсбургского университета был разработан новый высокочувствительный тест для обнаружения скрытых вирусов – тест TZA. Для его проведения требуется меньше времени и крови пациента.

Принцип действия TZA сводится к поиску гена, который активируется только при репликации вируса.

Несмотря на то, что разработчики уверены в эффективности теста, большинство специалистов склоняется к тому, что TZA не сможет заменить существующие методы диагностики полностью, поскольку он характеризуется иным механизмом действия и не подходит абсолютно каждому ВИЧ-инфицированному пациенту.

Где и как можно пройти диагностику ВИЧ

Сегодня тест на ВИЧ-инфекцию не является проблемой. При желании пациента, кровь на анализ можно сдать анонимно и абсолютно бесплатно.

Сделать это можно в медицинских организациях по месту жительства, в Свердловском областном центре профилактике и борьбы со СПИД (г. Екатеринбург, ул. Ясная, 46.

Регистратура: (343) 383-30-18 Телефон доверия по проблеме ВИЧ/СПИД: (343) 310-00-31 (будни, с 9 до 20 часов).

Диагностика ВИЧ – дело сугубо добровольное. Однако есть четыре ситуации, для которых прохождение теста является обязательным:

1. Донорство.
2. Трудоустройство на работу, предполагающую непосредственный контакт с биоматериалом, который может содержать ВИЧ.
3. Иностранные граждане.

Лица при призыве на военную службу, поступающие в военные учебные заведения.

Но и в этих случаях тестирование не может проводиться насильно, поскольку для любого медицинского вмешательства необходимо добровольное и осознанное согласие пациента. Именно осознанное, поскольку каждый из нас должен понимать важность своевременной диагностики ВИЧ.

Источник: http://profilaktica.ru/profilaktika-zabolevaniy/vich-infektsiya/profilaktika-vich-infektsii/diagnostika-vich-metody-i-issledovaniya/

Анализ на ВИЧ с помощью метода ПЦР: когда сдавать, какая точность

Главная › Диагностика ВИЧ ›

Способ лечения болезни, вызванной вирусом иммунодефицита человека, не найден до сих пор. Зато диагностика достигла серьезных успехов. Анализ на ВИЧ, выполненный методом ПЦР, – один из вариантов выявления вируса в организме.

Суть методики ПЦР при ВИЧ

Полимеразная цепная реакция, или ПЦР, – один из современных методов диагностики ВИЧ. В его основе лежит способность нуклеиновых кислот к саморепродукции. Клетка любого живого организма включает белок и нуклеиновые кислоты:

• РНК- рибонуклеиновую,
• ДНК- дезоксирибонуклеиновую.

Эти макромолекулы хранят генетический код. Если концентрация вирусных клеток в крови низкая, в пробе содержатся не целые цепочки ДНК, а их отдельные «кирпичики» – нуклеотиды.

Полимеразная цепная реакция выявляет даже такие «обломки» вирусных клеток.

Этот анализ крови на ВИЧ позволяет получить результат на ранних сроках после возможного заражения, когда клинические первые симптомы еще не появились.

Наиболее точный результат можно получить, используя для анализа венозную кровь. Перед тем как пройти обследование, за пару дней следует отказаться от жирной пищи и алкоголя. За 2 недели прекратить прием иммуностимулирующих препаратов.

Нормой является отрицательный результат анализа, который выглядит так: «ДНК вируса не обнаружено». Это и есть референсное (среднестатистическое) значение.

Преимущества и недостатки методики ПЦР при ВИЧ

Диагностика ВИЧ с помощью ПЦР имеет неоспоримые преимущества, но есть и существенные недостатки. К первым относятся:

• Высокая точность. Крайне мала вероятность получить ложноотрицательные результаты.
• Универсальность. Для исследования подходит не только кровь, но и другие биологические жидкости (влагалищные выделения, сперма). Слюна, моча также используются, но точность результата будет ниже. В этих средах концентрация вирусных клеток незначительна.
• Широкий спектр анализа. Один образец биоматериала можно исследовать на несколько заболеваний.
• Скорость выполнения. Полимеразная цепная реакция относится к срочным методам диагностики. Ответ можно узнать уже на следующий день.
• Достоверность составляет 80 %. С помощью метода ПЦР можно обнаружить вирусные частицы, даже если их концентрация невелика. Это позволяет диагностировать заболевание на ранних стадиях и своевременно начинать терапию.
• Ранняя диагностика ВИЧ-инфекции. Время, когда ВИЧ обнаруживают в крови при помощи ПЦР, – 10-14 дней после предполагаемого заражения. Это стандартный отрезок для диагностики вируса иммунодефицита. Антитела на этом этапе еще не обнаруживаются; метод ИФА не работает.
• Нет возрастных ограничений. Можно проводить это тестирование ребенку с момента рождения.

Недостатки метода ПЦР при диагностике ВИЧ:

• Более высокая стоимость в сравнении с иммуноферментным анализом 3 поколения.
• Требуется сложное медицинское оборудование.
• Погрешность 20%  в связи с высокой чувствительностью реакции. При аутоиммунных заболеваниях, злокачественных опухолях, хронических инфекциях ПЦР может дать ложноположительный результат.

Кому проводится ПЦР

Проведение этого анализа на ВИЧ рекомендовано в следующих случаях:

• Нужен ранний ответ для предварительного диагностирования. ПЦР помогает подтвердить или опровергнуть результаты ИФА.
• Иммуноблоттинг дал положительный результат. Если первым проводится ПЦР анализ, то обязательно подтверждение результата методом иммунного блоттинга. Исследования дополняют друг друга. Используя сразу 2 метода, медики исключают возможность ошибок.
• Когда позитивный ВИЧ-статус подтвержден, ПЦР помогает отследить эффективность проводимой терапии.
• Используется для исследования донорской крови на наличие антител к ВИЧ.
• Проводить ПЦР можно даже детям до года. Этот метод применяется, чтобы выяснить ВИЧ-статус новорожденных, мамы которых являются носительницами вируса. Тест, проведенный в первые дни жизни, покажет, произошло ли внутриутробное инфицирование. Заражение могло случиться, когда ребенок проходил по родовым путям. Положительный ВИЧ-статус, приобретенный младенцем в процессе родов, удастся выявить через 2 – 3 недели.

Сколько времени делается анализ ПЦР, и где можно сдать

Проведение анализа ПЦР на ВИЧ и расшифровка результатов не требуют много времени. Забор крови занимает 5-7 минут. В стандартном случае лаборанту достаточно 24 часов, чтобы подготовить справку. Диагностирование занимает не более 8 часов, остальное время требуется на оформление. Пациент получает отчет на следующий рабочий день. Экспресс-тестирование выполняют в течение 2 часов.

Исследования на ВИЧ указанным способом не проводят по полису ОМС. Получить эту услугу бесплатно в государственной поликлинике нельзя. Зато практически все коммерческие лаборатории обычно имеют необходимое оборудование и реагенты. Проведение анализа ПЦР часто входит в общий скрининг на ВИЧ. Цена комплексной диагностики составляет от 600 до 1000 руб.

Пройти процедуру можно анонимно. В регистратуре пациенту дают индивидуальный номер, по которому он узнает результат. Современные медицинские центры отображают все данные на своем сайте в личном кабинете клиента.

Анализ на ВИЧ с помощью метода ПЦР: когда сдавать, какая точность
Ссылка на основную публикацию

Источник: https://aids24.ru/diagnostika-vich/analiz-na-vich-metod-ptsr

Анализ ПЦР на ВИЧ достоверность и через сколько можно сдавать?

Существуют различные способы обнаружить вирус иммунодефицита, именно анализ на ВИЧ ПЦР методом заслуживает особого внимания. Он основывается на том, что находит генетический материал возбудителя. Это исключает ошибку практически гарантированно. Исторически методика планировалась как чисто научный способ, но нашла применение.

ПЦР через сколько можно сдать на ВИЧ при подозрении на заражение? Отличие как раз и заключается в оперативности, потому прописать такой анализ могут на самых ранних стадиях развития болезни.

Если потенциальный больной пришел к врачу сразу же после возможного инфицирования и признаков жизнедеятельности вируса еще нет, то будет назначен именно ПЦР анализ. Он работает уже с четвертого дня присутствия вирионов в крови.

Для точности рекомендуется анализ примерно на 14-й день после опасного взаимодействия.

Какова достоверность ПЦР на ВИЧ через 2 недели? Как установлено, достоверность определения наличия вируса методом полимеразно-цепной реакции очень не вызывает сомнений. С 80-х годов прошлого столетия именно этот тест массово применяется и считается одним из точнейших, его разработчик получил Нобелевскую премию. Лауреат предвидел перспективность полимеризации уже в ту эпоху.

Происхождение анализа методом ПЦР

Датой рождения можно назвать 1983 год. Метод основан на том, чтобы вычленить фрагмент нуклеотидной цепи чужака, это может быть как рибонуклеиновая кислота так и дезоксирибонулеиновая, искусственно размножить его и исследовать.

Специалист по ПЦР ДНК ВИЧ берет и размножает по принципу комплементарности, выстраивая довольно длинную цепочку, которую удобно рассмотреть и подвергнуть тестированию. ПЦР РНК ВИЧ осуществляется так же, только берется плазма или сыворотка.

Возникновение этого подхода в широкой практике явилось настоящим прорывом и позволило совершить большой шаг в вопросе помощи больным. Таким образом стало реальным помогать людям на самых ранних этапах, обнаруживать недуг еще до появления специфичных антител. С этого дня истории медицины, ВИЧ уже не является приговором.

Диагностика ВИЧ ПЦР

Для исследования методом полимеразно-цепных реакций надо взять совсем немного инфекционного материала, потому поставить диагноз можно быстро и безотлагательно.

Диагностика ВИЧ ПЦР точна, требует виртуозного уровня квалификации от работников, которые занимаются исследованием. Современные лабораторные помещения много раз проверяют данные, которые получают, прежде чем сообщить итог обратившемуся.

Диагностика ВИЧ инфекции ПЦР методом занимает один день или несколько, все зависит от загруженности персонала.

Есть некоторые желательные условия к сдающему анализ, чтобы получить максимально правдивый ответ:

• Не есть 8-10 часов, если к этому нет противопоказаний;
• За пару дней отказаться от алкоголя;
• Сутки до не практиковать спортивных упражнений.

Это все, что должен сделать испытуемый. Остальное – дело медработников. Стерильность в помещении должна быть 100%, референц-лаборатории ведущих центров регулярно проверяются на предмет чистоты и исправности стерилизаторов. ПЦР применяют и для того чтобы удостовериться в диагнозе, и для подсчета вирусных частиц в крови, то есть вирусной нагрузки.

Через сколько можно сдать анализ ПЦР на ВИЧ?

Многие все же не доверяют результатам, которые получаются в первые дни после контакта с возбудителем. Анализ на ВИЧ ПЦР через какое время считается самым оптимальным? Чем больше времени проходит с момента попадания вируса в тело, тем проще его выявить.

Но не следует забывать, что и лечить больного со временем все сложнее. Если достоверно известно, что был контакт с больным человеком, то не следует тянуть больше 14 дней.

Если нет информации о контактах с положительными на ВИЧ людьми, то анализ нужно сдать сразу при появлении первых симптомов.

ПЦР ВИЧ на 9 неделе имеет высокую точность, но на этом сроке могут предложить и другое исследование, ИФА. Этот альтернативный анализ более дешевый, также точный, но основан на исследовании антител, которые, к сожалению, появляются не сразу после инфицирования. В идеале, для подтверждения диагноза, проводят оба анализа, сроки устанавливает врач.

Качественный ПЦР на ВИЧ дает понимание, действительно ли вирус иммунодефицита присутствует в организме. Этим же методом можно определить и другие инфекции.

Как проходит анализ на ВИЧ методом ПЦР?

Анализ на ВИЧ методом ПЦР процедура не сложная и начинается с забора венозной крови у пациента. Исследовать могут как ДНК, так и РНК, но сама процедура взятия материала будет одинаковой.

С помощью специальных реагентов, праймеров, в стерильной лаборатории проводится анализ.

За единицу времени количество копий вырастает до определенных значений, эти значения оценивает сотрудник лаборатории.

Проводится также определение возбудителя, чтобы установить, что речь идет о том самом вирусе. Таким образом, метод дает возможность качественного и количественного исследования биоматериала.

При каких условиях диагностика ВИЧ инфекции ПЦР методом обязательна?

Так как анализ не из дешевых, его проводят не всем и не всегда. Правда, есть ряд случаев, когда он обязателен. Донорам, к примеру, обязательно нужно сдать анализ на ВИЧ ПЦР. Также анализ проводят в случае непредвиденных аварий в медицинских учреждениях и лабораториях, и при этом есть риск контактов здоровых людей с кровью инфицированных.

В большинстве случаев исследование проводится на добровольных началах. Обязать могут только медицинских работников и, иногда, педагогов и других работников сферы образования, которые контактируют с маленькими детьми. Также основанием для принудительного обследования могут послужить признаки резкого снижения иммунитета.

Результаты анализа ПЦР на ВИЧ их точность и достоверность

Тест ПЦР на ВИЧ достоверность показывает очень высокую, до 99%. Следует напомнить, что точность зависит и от срока. На пятый день после проникновения вируса в тело, точность составляет примерно 80%. Уже к 14 дню этот показатель повышается до 98%. Далее доходит до 99%.

Практика показывает, что ложноотрицательных результатов практически не бывает, порой случаются ложноположительные. ПЦР на ВИЧ точность 99% дает вполне хорошее представление о состоянии здоровья человека, контактировавшего с ВИЧ-позитивными людьми.

Анализ ПЦР ВИЧ на раннем этапе дает шанс оперативно среагировать на проблему, и своевременно принять меры по продлению активной жизни. Провериться будет не лишним, если есть риск заражения.

ПЦР на ВИЧ отрицательный, что это значит?

ПЦР на ВИЧ отрицательный, как уже было сказано выше, практически не может быть ложным. В таких ситуациях врач ставит диагноз «здоров» и дальнейшее обследование не показано, если, конечно, ос временем не появится клинических симптомов заболевания.

Что делать при положительном результате анализа ПЦР при ВИЧ?

Ситуация совсем иная, когда ПЦР тест на ВИЧ дал положительный результат. В этом случае можно рассчитывать на ошибку, но, чтобы подтвердить эту гипотезу, необходимо продолжить обследование. Повторный тест и дальнейшее исследование другими методами провести нужно обязательно, и врач обязательно назначит анализы. Игнорировать требования врача нельзя.

ПЦР при ВИЧ проводится на ранних стадиях, а также иногда назначается при прохождении пациентом антиретровирусной терапии.

Перспективы теста ПЦР

Метод ПЦР в диагностической медицине можно считать перспективным, действенным и точным. Пока что единственным его минусом можно считать высокую стоимость.

Исследование генетического материала вирусной частицы дает возможность с высокой точностью подтвердить или опровергнуть наличие инфекции, а также предсказать скорость развития заболевания.

ДНК тест на ВИЧ, или же РНК анализ, дает точность до 99%, причем на самых ранних этапах. Раннее диагностирование ВИЧ дает огромные шансы на успешную терапию.

Результат оценивают после 14 дней с предполагаемого момента проникновения вируса, предположительно это может незащищенный половой контакт или инъекции иглой сомнительной чистоты. Отрицательный результат при анализе ПЦР можно считать достоверным, в то время как положительный подлежит дополнительной проверке.

*Если вам не повезло и анализ ПЦР на ВИЧ показывает положительный результат, не стоит отчаиваться. В настоящее время существует целый список эффективных антиретровирусных препаратов, которые способны замедлить развитие болезни и продлить жизнь на 30-40 лет.

Источник: https://medinfo.club/analiz-ptsr-na-vich/

Пцр — анализ крови на вич, спид

Почему так страшен ВИЧ и СПИД, какие существуют методы диагностики. Углубленная информация про ПЦР-исследования.

Вирус иммунодефицита человека. Чума 20-го века

По статистике, предоставленной Всемирной организацией здоровья совместно с организацией ООН ЮНЭЙДС, за последние сорок лет более 25 миллионов пациентов скончались от заболеваний ВИЧ и СПИД.

Не зря эпидемиологи окрестили ВИЧ чумой 20-го века, так как урон, нанесенный этой инфекцией человечеству, имеет колоссальные масштабы. Наиболее сильно заражению подверглись страны африканского континента.

Заражение сильно бьет по экономике и без того нестабильных государств, народ нищенствует.

В нынешнее время технологический прогресс шагнул далеко: изобретены новейшие способы диагностики вируса ВИЧ и СПИДа, лечение доступно для любого человека планеты, достоверность анализов характеризуется малой долей погрешности, а терапия большим процентов эффективности.

Диагностика инфекции ВИЧ

В нашей стране выявление присутствия в организме пациента ВИЧ-инфекции представляет собой комплекс анализов:

• Иммуноферментный анализ
• Иммунный блоттинг
• Полимеразная цепная реакция
• Экспресс-тесты

Иммунофермнтный анализ

Скрининг (тест ИФА) является первоначальной стадией определения заражения в организме. Он базируется на образованных в искусственных условиях белковых соединениях вируса, которые идентифицируют продуцируещиея иммунными клетками антитела как реакцию на заражение. Происходит химическая реакция между реактивами, вследствие чего индикаторный элемент меняет цвет.

Значит, результат теста положительный. Информацию по такому способу можно получить через пару недель с момента инфицирования. Таковой способ выявляет не присутствие инфекции у пациента, а определяет вырабатывающиеся к этой инфекции антитела.

Бывает, продуцирование антител стартует через 10-15 дней с момента инфицирования, но в подавляющем большинстве случаев позднее – через 1-1,5 месяца.

Информация по такому анализу обрабатывается от двух до десяти дней.

Достоверность диангоза на ВИЧ подкрепляется анализом ИБ. Исключительно положительный тест ИБ на вирус может служить веской причиной для утверждения инфицирования.

Суть анализа:

В лаборатории берут пробу венозной крови на анализ. Пробу дополнительно подготавливают, белковые соединения, которые в ней присутствуют, электризуются в испытательной камере, далее их распределяют в гелевой субстанции соответственно молекулярной массе.

Бумажную полосу с напылением реактива несколько раз помещают в подготовленную пробу. При наличии в пробе антител к вирусу происходит химическая реакция и на тестовой полосе становятся видны черточки.

Когда появляются 2 или 3 черточки p24, gp41, и gp120 или gp160, результат теста положительный.

При получении положительного результата по анализу ИБ с погрешностью в один процент можно сделать заключение о наличии инфекции ВИЧ в организме.

Экспресс-тесты на ВИЧ и СПИД

Новейшими технологиями для определения вируса иммунодефицита в организме являются экспресс-методы. Информацию по такому анализу можно получить через несколько минут после проведения.

Наиболее высокая достоверность у иммунохромаграфических тестов – специальных тест-полос, на поверхности которых напыляется слой реагента. Антитела, содержащиеся в испытуемом материале, контактирует с реагентом, изменяя окраску индикатора.

Через несколько минут проявляются две полоски, что указывает на наличие инфекции. Наличие единственной полосы означает отсутствие инфекции.

Такой тест можно использовать как дополнительный, информация по такому тесту обязательно подтверждается другими исследованиями.

Сколько стоит экспресс-тест на ВИЧ?

Экспресс-тест на ВИЧ в среднем обойдется в 200-1000 рублей.

Полимеразная цепная реакция

ПЦР – анализ крови, позволяющий с малым процентом погрешности определить присутствие заражения инфекцией в организме. Практическая суть данного способа тестирования в анализе молекул дезоксирибонуклеиновой и рибонуклеиновой кислоты.

Нередко встречается, что разные инфекции с разной этиологией протекают со схожей симптоматикой. Анализ ПЦР диагностирует инфекцию, причину ее образования, классифицирует степень заражения пациента и количественный состав вредоносных микроорганизмов.

С помощью ПЦР специалист способен выявить даже крошечную толику молекул вируса, содержащуюся в организме, а при идеальных условиях одинарные злокачественные бактерии и штаммы вируса.

Такая информативность обеспечивает специалисту возможность правильного выбора курса терапии.

Подробно о сути анализа

Анализ основывается га многочисленном повторении отдельно выбранного отрезка цепи ДНК с добавлением ферментов в лабораторной среде. В ходе процесса копируется тот отрезок, который подходит по нужным параметрам и обязательно, чтобы этот отрезок был частью испытуемой пробы. Маленькие отрезки ДНК копируются в специально созданной среде с добавлением химических веществ, ускоряющих процесс.

Компоненты реакции

Для проведения ПЦР в простейшем случае требуются следующие компоненты:

• Матрица дезоксирибонуклеиновой кислоты с присутствием отрезка ДНК, готовящегося к амплификации
• Пара праймеров – по одному для каждого из отрезков цепи
• Специальное химически активное вещество полимераза, которое ускоряет процесс полимеризации ДНК.
• Дезоксирибонуклеозидтрифосфаты
• Заряженные частицы магния двухвалентного
• Буферный раствор, который создает нужные условия для протекания процесса, а именно кислотность, концентрацию соли и заряженных частиц магния в растворе.

Обычно для защиты образца от перегрева в пробу с реагентами помещают вазелин, так как этот продукт содержит жиры и имеет высокую температуру кипения.

Анализ ПЦР диагностирует РНК инфекции. Характерная особенность такого анализа – большая достоверность, он помогает выявить заражение вирусом ВИЧ через полторы недели с момента инфицирования. Иногда бывает, что анализ дал ложные сведения, потому как его сильная чувствительность вызывает реакцию на антитела к другим вирусам в организме.

Сколько стоит сдать ПЦР-исследование?

Такой способ диагностики не дешевый. Он предполагает наличие новейшей медицинской аппаратуры и определенных знаний в этой области. Поэтому ПЦР-диагностика не используется для групповых анализов.

Анализ на ПЦР можно сдать в специализированных клиниках нашей страны в среднем за 3500 рублей.

ПЦР-диагностика. Причины для проведения

ПЦР назначают для:

• Диагностики ВИЧ у ребенка, если мать была подвержена заражению инфекцией – вирус мог передаться через плаценту внутриутробно.
• Определения вируса, когда иммуноферментный анализ дал размытые сведения
• Отслеживания количественного уровня вируса в организме
• Тестирования доноров

Результат анализа ПЦР не является достаточным основанием для постановки диагноза. Для этого нужно комплексное обследование наряду с прохождением других тестов. ПЦР скорее используется как вспомогательный метод, позволяющий разобраться в сложных случаях.

Сколько стоит сдать анализ на ВИЧ?

Помощь по диагностике вируса иммунодефицита можно получить абсолютно бесплатно в государственных медучреждениях. В частных клиниках диагностика ВИЧ обойдется от 3 до 5 тысяч рублей.

Источник: https://testanaliz.ru/pcr-na-vich